影响大肠杆菌电转化效率因素的探讨

• 作者: 关璐媛 张晓楠 张秀敏 王丽 王涛 肖玉 赵玮钦 黄勇
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 感受态细胞 大肠杆菌DH5 a 电穿孔 转化效率
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 466-468,472
• 页数: 4页
• 分类号: R563
• 字数: 2690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.04.023

摘要

目的 探讨影响大肠杆菌DH5 a电转化效率的几个关键但易被忽略的因素.方法 于室温(25℃)用空气浴振荡和水浴振荡培养大肠杆菌DH5 a,用10%(V/V)甘油-水溶液和10%(V/V)甘油-生理盐水溶液冻存所制感受态细胞.在电压2.5kv、电阻200Ω、电容25μF的条件下进行电转化,电击冰浴(0～10min)后测定转化效率.结果 于25℃水浴振荡培养细菌、10%甘油-生理盐水溶液冻存感受态细胞、电转化后冰浴6min,转化效率高速1.01×1010CFU/μg DNA.结论 该法适合于大肠杆菌DH5 a,可获得较高的转化效率.