低温培养对大肠杆菌电穿孔转化效率的影响

• 作者: 于文功 褚艳 韩峰
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 低温培养 感受态细胞 大肠杆菌DH5α 电穿孔 转化效率
• 年，卷（期）: 2003,（9）
• 所属期刊栏目: 生物与现代农业技术
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 3896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2003.09.007

摘要

在18℃和37℃振荡培养大肠杆菌DH5α并制备感受态细胞,用Eppendorf公司的Multiporator电转移仪进行电穿孔转化,研究了培养温度对转化效率的影响.实验结果表明,低温(18℃)培养的细菌,回收时的OD600值在0.5～1.0时,转化效率都维持在高水平;而在37℃培养的细菌,转化效率仅在OD600 0.6～0.7时出现一个锐利的峰值,此OD600值前后转化效率显著下降.在不影响细胞生长的情况下,18℃培养细菌的转化效率随电场强度增加而升高;而37℃培养的细菌在电场强度超过20.5 kV/cm时转化效率将大幅度下降.另外,还对影响转化效率的其他因素(培养基、振荡培养时的转速、细胞密度、质粒浓度、电击前后冰浴时间等)进行了优化,建立了一个便利而高效的质粒DNA电转化方法,获得1.02×1010cfu/μg DNA的高转化效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于文功	中国海洋大学海洋药物与食品研究所	64	501	12.0	20.0
2	韩峰	中国海洋大学海洋药物与食品研究所	21	304	10.0	17.0
3	褚艳	中国海洋大学海洋药物与食品研究所	2	36	2.0	2.0