定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法

• 作者: 张为民 林浩然 邓利 郑汉其
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 黑鲷 受体,促生长素 核糖核酸酶保护测定
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: R394-33
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2003.01.003

摘要

目的建立液相杂交/核糖核酸酶保护测定(Ribonuclease Protection Assay, RPA)技术定量检测黑鲷(Sparus macrocephalus)生长激素受体mRNA水平. 方法将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM-T载体,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交,用RNase A和RNase T1降解杂交产物的单链RNA,双链杂交体得到保护,然后检测杂交体的分子大小及放射强度. 结果检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达,表达水平在肝脏中最高.该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合. 结论为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林浩然	中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室	103	1848	23.0	38.0
2	张为民	中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室	21	511	12.0	21.0
3	邓利	中山大学水生经济动物研究所广东省水生经济动物良种繁育重点实验室	6	135	5.0	6.0
4	郑汉其	香港中文大学生物化学系	5	58	3.0	5.0