魏氏梭菌贵州分离株α-毒素基因的克隆与表达

• 作者: 周碧君 文明 李海阔 王开功
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 魏氏梭菌 α-毒素基因 克隆 基因表达 重组
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 499-504
• 页数: 6页
• 分类号: S852.616.3(273)|Q784|Q786
• 字数: 5224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0457.2003.06.006

摘要

提取已鉴定的A型魏氏梭菌Clostridium welchii贵州分离株的染色体DNA,经酶切回收分子长2～4kb的DNA片段混合物,将其插入质粒载体pUC19中,并转化至E.coli JM109,通过Amp抗药性和显色反应的选择,再提取阳性重组细菌质粒进行探针检测、酶切分析和PCR鉴定,筛选出含魏氏梭菌α-毒素基因的重组大肠杆菌;经溶血与溶血抑制试验及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实,重组E.coli的表达产物符合α-毒素的生物学特性.