用阴离子交换层析纯化牛皮蝇素A蛋白的研究

• 作者: C.Boulard N.Moire 何国声 孙怡 孟秀珍 徐梅倩 曹杰 朱顺海 顾越星
• 来源期刊: 中国兽医寄生虫病
• 学科: 农学
• 关键词: HA 重组蛋白 阴离子交换层析 SDS-PAGE 斑点免疫金渗滤法
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 1-3
• 页数: 4页
• 分类号: S858.230.274.3
• 字数: 3092字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2003.01.001

摘要

建立了用阴离子交换层析AKTAFPLC纯化果蝇S 2细胞分泌的重组牛皮蝇素A(Hypodermotin A,HA)的方法.将诱导培养3天的S2细胞上清液浓缩后,经25mM pH8.5 Tris HCl缓冲液透析,在Mono Q柱上以Tris HCl+NaCl为流动相进行分离.在检测波长280nm处获得蛋白峰.经SDS-PAGE分析,第一峰的分子量与原重组蛋白HA分子量相符,并对明胶大分子具有酶活性;用斑点免疫金渗滤法检测证实对牛皮蝇抗体具有免疫原性.用阴离子交换层析纯化HA的方法具有获得的蛋白质纯度高、操作简便、生产效率高等特点.