利用酵母人工染色体(YAC)减数分裂同源重组构建人免疫球蛋白κ链基因组大片段

• 作者: 卢步峰 卢波 徐燕萍 聂志妍 郭礼和
• 来源期刊: 实验生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母人工染色体 减数分裂 同源重组 人免疫球蛋白κ轻链
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 页码范围: 130-136
• 页数: 7页
• 分类号: Q5
• 字数: 4210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-520X.2003.02.008

摘要

具有同源重叠区的酵母人工染色体(YAC)可以利用酵母细胞减数分裂进行同源重组,从而构建更大的人工染色体基因组,这对生命科学基础研究和生物技术应用研究有着非常重要的意义.本实验以两个含人免疫球蛋白κ链基因簇片段的YAC克隆为材料,通过酵母改型、异型接合、二倍体发孢、单孢子筛选和分子生物学鉴定等技术和方法,利用酵母菌减数分裂同源重组机制,构建了一条包含人的免疫球蛋白κ轻链32个Vκ基因、5个Jκ基因、Cκ基因、Eκ基因和κde基因的YAC重组体,长度约400kb.同时,本实验利用溶壁酶消化法获取单孢子重组体,代替了传统的显微分孢操作.使得利用酵母人工染色体减数分裂同源重组的技术更加简便可行.