人脐动脉平滑肌细胞体外培养的生物学特性及其永生株的初步建立

• 作者: 万琳 冯莉 刘瑾 卢晓风 孙明菡 李幼平 李胜富 樊瑜波 步宏 田佳
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人脐动脉平滑肌细胞 永生性 端粒酶催化亚基
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-192
• 页数: 4页
• 分类号: Q813|R392
• 字数: 3699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2003.02.001

摘要

目的建立人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)原代、传代培养的最佳方法,并初步建立其永生株.方法采用人脐动脉血管中膜组织块贴壁法原代培养,比较不同培养基对原代及传代细胞增殖的影响;选择标记为新霉素(G418)的带有端粒酶催化亚基(hTERT)基因的重组质粒导入人脐动脉血管平滑肌细胞.结果经α-肌动蛋白鉴定,组织块贴壁法可获得高纯度的HUASMC.原代培养的HUASMC 1～4代细胞增殖能力强、生长旺盛,此后细胞的增殖能力逐渐降低,到第10代几乎丧失增殖力.原代培养以MCDB131为最佳培养基.hTERT转染细胞克隆由长梭形变为短梭形,接触抑制消失,生长速度快,目前已传至20代,增殖能力与第1代无差别.转染前后平滑肌特异的α-肌动蛋白表达阳性.结论 hTERT转染的HUASMC保留了HUASMC的基本生物学特征,能保持较强的增殖能力持续传代.