利用GAD67-GFP基因敲入方法显示小鼠脊髓内表达GFP的GABA能神经元的分布

• 作者: 小幡邦彦 李云庆 柳川右千夫 武胜昔 玉卷伸章 王亚云 金子武嗣
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: γ氨基丁酸 谷氨酸脱羧酶67 绿色荧光蛋白 转基因 脊髓 小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 233-242
• 页数: 10页
• 分类号: R316|R318
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2003.03.001

摘要

γ氨基丁酸(GABA)是脊髓背角、前角内主要的抑制性神经递质.为了更好地观察脊髓背角内GABA能神经元的形态和功能,本研究使用了两种谷氨酸脱羧酶67绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠,并观察了敲入小鼠脊髓内的GFP表达状况.用免疫荧光组织化学双标记方法显示脊髓内所有的GFP阳性神经元基本上都呈GAD67和GABA阳性;GFP阳性神经元在脊髓背角的Ⅰ～Ⅲ层最为密集,背角深层内侧部及中央管周围呈中等密度分布,而在脊髓背角其它部位及前角则呈散在分布.脊髓内GFP阳性神经元的分布与GABA能神经元的分布一致.本文作者等还进一步在GAD67-GFP敲入小鼠中观察了GFP和神经元标志物神经元核蛋白(NeuN)的共存状况.脊髓背角内GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ层的NeuN阳性神经元的31.5%、33.3%和44.7%,与以往的GABA免疫组化研究结果基本一致.本研究表明GAD67 GFP基因敲入小鼠脊髓内的GFP在GAD67启动子的调节下正确地表达于GABA能神经元,该基因敲入小鼠可用于脊髓GABA能神经元的形态学特征和生理学特性及其发育规律等方面的研究.