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摘要:
目的观察人关节软骨细胞在体外单层培养过程中的去分化,以及转染TGF-β2在关节软骨细胞内的表达和对去分化的抑制作用.方法从手术中切除的软骨组织中分离培养成人关节软骨细胞,通过脂质体介导的方法将已构建的pcDNA3.1(+)/TGF-β2转染到体外单层培养的软骨细胞中.采用RT-PCR、ELISA、组织学染色、免疫组化和原位杂交的方法,分别对转染组和未转染组的第1、6、9代细胞进行检测,比较目的基因表达、软骨细胞形态以及胶原和多糖生物合成的差异.结果经多次传代后,未转染软骨细胞在体外单层培养过程中逐渐走向去分化,TGF-β2、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚糖体的表达逐渐减低,而Ⅰ型胶原的表达增高.目的基因在转染组各代软骨细胞内均得到表达,转染后细胞保持软骨细胞的形态,Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚糖体表达虽有降低,但均高于未转染的同代细胞,而Ⅰ型胶原表达增高的程度低于未转染细胞.结论人关节软骨细胞在体外单层培养中有去分化趋势;pcDNA3.1(+)/TGF-β2真核表达载体转染人关节软骨细胞获得成功,在转染后关节软骨细胞内稳定表达,并对软骨细胞的去分化有抑制作用.
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CRISPR/Cas9
慢病毒
关节软骨细胞体外培养及生物学特性的实验研究
细胞培养
关节软骨
生物学特性
内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 TGF-β2转染关节软骨细胞的实验研究
来源期刊 中华骨科杂志 学科 医学
关键词 转化生长因子β 转染 软骨细胞 关节
年,卷(期) 2003,(7) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 434-438
页数 5页 分类号 R68
字数 4976字 语种 中文
DOI 10.3760/j.issn:0253-2352.2003.07.012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王卫国 北京大学第三医院骨科 6 157 5.0 6.0
2 娄思权 北京大学第三医院骨科 57 839 15.0 27.0
3 夏家辉 中南大学中国医学遗传学国家重点实验室 40 368 11.0 17.0
4 佘华 中南大学中国医学遗传学国家重点实验室 1 52 1.0 1.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
转化生长因子β
转染
软骨细胞
关节
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华骨科杂志
半月刊
0253-2352
12-1113/R
大16开
天津市河西区解放南路406号
6-17
1981
chi
出版文献量(篇)
5489
总下载数(次)
8
总被引数(次)
111169
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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