大鼠脑组织中p75基因克隆及其探针制备

• 作者: 丁斐 刘梅 顾晓松
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: p75基因 T-A克隆 地高辛标记 原位杂交 大鼠
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: R74|R318|R322
• 字数: 2865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2003.01.005

摘要

为了克隆大鼠p75基因并制备地高辛标记的p75 cDNA探针(dig-p75 cDNA),本研究采用RT-PCR法,从大鼠脑组织mRNA中扩增p75基因mRNA部分片段,克隆入T载体,并经序列测定.以dig-p75 cDNA为探针,采用原位杂交方法观察成年SD大鼠海马组织中p75 mRNA的表达.结果:RT-PCR法扩增出一种特异产物与预期长度386 bp相符,T载体克隆测序与p75基因100%同源.原位杂交结果显示,阳性信号出现在成年大鼠海马组织中.结论:采用RT-PCR和T载体技术获得了大鼠脑组织p75基因克隆,dig p75 cDNA探针原位杂交显示正常SD大鼠海马组织中表达p75 mRNA.