检测实验动物弓形虫感染的两种PCR方法的建立和比较

• 作者: 何国声 张俐 陈俏梅
• 来源期刊: 中国兽医寄生虫病
• 学科: 农学
• 关键词: 弓形虫 常规PCR 巢式PCR 实验小鼠 方法比较
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723
• 字数: 3202字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2003.02.002

摘要

为了建立敏感、稳定、特异的PCR检测体系,用于实验动物弓形虫感染的检测.采用B1基因设计引物,建立常规PCR,用P30基因设计引物,建立巢式PCR;用两种PCR方法检测实验感染弓形虫小鼠血液和腹腔液中的DNA动态变化;用巢式PCR检测自然状态下的普通级豚鼠、教学和科研用兔的弓形虫感染率,并和常规PCR检测结果比较.结果,巢式PCR可检测到1fg DNA含量,比常规PCR敏感100倍;对其他微生物DNA无交叉现象,特异性强;对同一样品重复检测3次,阴、阳性结果一致,稳定性好.小鼠感染弓形虫2 d后,巢式PCR对小鼠腹腔液的阳性检出率为83.3%,对血液的阳性检出率为33.3%;感染3 d后,腹腔液阳性检出率为100%;而常规PCR在小鼠感染3 d和4 d后才能在腹腔液和血液中检测到,检出率各为16.7%.受检普通级豚鼠没有感染弓形虫,教学和科研用免的弓形虫总感染率为14.3%.结论认为,巢式PCR方法可用于实验动物弓形虫早期感染的检测,具有敏感性高、特异性强、稳定性好的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何国声	中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所	44	251	9.0	12.0
2	陈俏梅	上海生物制品研究所国家实验动物寄生虫质量检测中心卫生部上海实验动物检测中心	3	36	3.0	3.0
3	张俐	上海生物制品研究所国家实验动物寄生虫质量检测中心卫生部上海实验动物检测中心	1	25	1.0	1.0