利用电转化和三亲杂交方法高效转化根癌农杆菌

• 作者: 姚新生 徐威 朱宝泉 朱春宝
• 来源期刊: 沈阳药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 三亲杂交 电击转化 基因转移 转移DNA 根癌农杆菌LBA4404 多聚酶链式反应
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 生物药学
• 页码范围: 451-454
• 页数: 4页
• 分类号: R94
• 字数: 3085字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2858.2003.06.019

摘要

目的探索根癌农杆菌的高效转化方法.方法考察质粒经电击转化法转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens LBA4404)的影响因素,并优化其转化条件;研究采用三亲杂交方法,将带有vgb基因簇的重组质粒pYG308导入A. tumefaciens LBA4404;经PCR扩增反应进行验证.结果外加电场强度和脉冲时间是决定电转化效率的关键因素,两者适当组合才可获得高转化效率;采用对数期中期的细菌和提高细菌浓度均可提高转化效率.用三亲杂交方法转化A.tumefaciens LBA4404,可得到较高的转化效率.所获抗性转化子的质粒DNA酶切图谱正确.结论 带有双元载体(含vgb基因)的根癌农杆菌构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱宝泉		97	691	14.0	20.0
2	朱春宝		51	394	11.0	17.0
3	姚新生	沈阳药科大学制药工程学院	172	4148	37.0	53.0
4	徐威	沈阳药科大学制药工程学院	53	192	8.0	12.0