CD40-CD40配体相互作用对培养的人单核细胞二酰基甘油-蛋白激酶C信号通路及胞内Ca2+的影响

• 作者: 严金川 仲人前 吴宗贵 孔宪涛 张玲珍
• 来源期刊: 中国药理学报（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: CD40抗原 CD40配体 蛋白激酶C 二酰基甘油 单核细胞 信号转导 钙
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 687-691
• 页数: 5页
• 分类号: R96
• 语种: 英文

摘要

目的:探讨CD40-CD40配体(CD40L)相互作用是否能激活人 外周血单核细胞(PBMC)内二酰基甘油(DAG)-蛋白激酶C (PKC)信号通路.方法:细胞内DAG含量采用放射酶标记、 薄层层析和放射自显影方法检测.细胞PKC活性及胞内游离 钙分别采用[γ-32P]ATP磷酸转移法和Fluo-3荧光负载流式细 胞术检测.结果:CD40L以剂量依赖方式刺激人外周血单核 细胞合成DAG，并具有双时限性变化，第一峰值在20 s，第 二峰值在10 min时出现.然后DAG水平缓慢下降，至少持 续20-30 min.单核细胞蛋白激酶C总活性受CD40L刺激后 明显增加，峰值在12 min，持续20 min以上.并且这种作 用主要是胞浆PKC活性向胞膜PKC活性转位所致.CD40L能 刺激胞内游离Ca2+出现短暂的快速升高，继之为持续阶段. 移去细胞外Ca2+，胞内快速阶段无影响，而持续阶段明显 受到抑制.抗CD40抗体能显著抑制CD40L引起的胞内DAG- PKC信号通路激活及[Ca2+]i的动态变化.结论:CD40-CD40L 相互作用能激活人外周血单核细胞[Ca2+]i动态变化及二酰基 甘油-蛋白激酶C信号通路.