摘要:
目的:观察小剂量茶碱是否对体外培养的哮喘模型大鼠气道上皮细胞中NF-κB的活性存在影响.以进一步阐明茶碱类药物抗炎作用和免疫调节作用的机制.方法:雄性Wistar大鼠随机分为 2组,对照组(5只),哮喘模型组(15只);模型组以卵清蛋白致敏和激发,建立哮喘模型 .体外培养哮喘模型组和对照组大鼠的气道上皮细胞.分别观察加入脂多糖(LPS)刺激前后N F-κB活性的变化;在哮喘模型组大鼠的气道上皮细胞中加入不同浓度的氨茶碱与LPS(1 μg*ml -1)共同培养4 h 后,以及加入同一浓度氨茶碱和LPS(1 μg*ml-1)共同培养不同时间后NF-κB活性的变化.NF-κB活性采用免疫组织化学方法检测,以细胞核染色作为阳性标准,以细胞核阳性的百分比表示NF-κB的活性.结果:经LPS刺激前,对照组和哮喘组大鼠气道上皮细胞胞浆NF-κB均有一定程度的表达.细胞核表达的细胞,哮喘组为(6.4%±1.2)%,而对照组为 (4.7%±1.7)%,二者相比较,其差异具有统计学意义(P<0.05 ) .经1 μg*ml-1脂多糖刺激2 h 后,两组细胞胞核NF-κB表达均明显上升,哮喘组为(82.5±5.2)%,对照组为(79.3±3.4)%,两者相比,无统计学差异(P>0.05).在哮喘组大鼠上皮细胞中加入1 μg*ml-1脂多糖及各种浓度氨茶碱共同培养4 h 后,NF-κB活性均有所下降.0 μg*ml-1(不加茶碱)组,5 μg *ml-1组,10 μg*ml-1组,15 μg*ml-1组NF-κB活性分别为(84.3 ±3.2)%,(82.8±2.5)%,(78.4±6.3)%,(75.6±4.1)%.除5 μg*ml-1组与0 μg*m l-1(不加茶碱处理)组之间的NF-κB活性,无统计学差异(P>0.05)外,其余各组间两两比较,差异均有显著性(P <0.05).哮喘组上皮细胞经1 μg*ml-1脂多糖及10 μg*ml-1氨茶碱共同培养2 ,4,24 h.2 h 与4 h 处理组NF-κB活性与不加茶碱处理组相比,差异有显著性 ([ WTBX P<0.05).24 h 组与不加茶碱处理组相比差异无显著性(P>0.05),但茶碱处理组内不同处理时间组间比较,差异无显著性 (P>0.05),哮喘大鼠气道上皮细胞中的基础NF-κB活性较对照组高.结论:茶碱类药物可抑制体外培养的大鼠气道上皮细胞中的NF-κB的活性,并可能呈浓度依赖性,而与作用时间无明显关系.