硫代磷酸酯寡核苷酸的合成及其对内皮细胞组织因子(Tissue factor,TF)基因表达及TF促凝活性的作用

• 作者: 应大君 戴光明 李黔宁 郑健
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 硫代磷酸酯寡核苷酸 组织因子 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 71-75,90
• 页数: 6页
• 分类号: R3
• 字数: 4232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-5515.2003.01.020

摘要

为合成与TF基因启动子区切应力反应元件(Shear stress responsive element,SSRE)形成三链DNA的硫代磷酸酯寡核苷酸(Triple helix-forming phosphorothioate oligodeoxynucleotides,TFO-ps),探讨其对内皮细胞TF基因表达及TF促凝活性的影响.我们设计反向TFO(T21GTa)序列,采用固相亚磷酰胺三酯固相法合成TFO.在TFO的3′末端进行硫代磷酸酯修饰.应用电泳迁移分析(Electrophoretic mobility shift assays,EMSA)观察寡核苷酸和硫代脱氧寡核苷酸的亲和性.在ECV304内皮细胞株观察γ-32P标记硫代磷酸酯TFO的细胞摄取及其对TF基因表达的影响.结果显示,TFO-ps(T21Gta-ps)与靶序列能形成三链DNA,其Kd值为3.6×10-10M.在内皮细胞株ECV304细胞, TFO-ps(T21GTa-ps)的细胞吸收率为11.65%,主要分布在核沉淀,约占吸收总量的77.25%,显著降低内皮细胞TF基因mRNA表达及TF蛋白合成的平均光密度(AOD)值,显著降低TF的促凝活性.以上结果表明,TFO-ps(T21GTa-ps)具有较好的抗凝活性,其机制与抑制TF基因表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑健	第三军医大学新桥医院神经内科	102	699	14.0	21.0
2	李黔宁	第三军医大学新桥医院神经内科	43	201	7.0	11.0
3	应大君	第三军医大学基础部解剖教研室	69	445	12.0	18.0
4	戴光明	第三军医大学新桥医院神经内科	29	161	8.0	12.0