氧化还原作用对热休克转录因子1结构和功能的调控

• 作者: LIU Alice Y 徐康 林正 马中富 黄帆
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人热休克转录因子1 氧化还原 巯基 半胱氨酸
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 542-547
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 语种: 英文

摘要

为了评价半胱氨酸巯基氧化还原介导剂对人热休克转录因子1(hHSF1)的氧化还原、结构和功能的作用, 在体外用浓度为0.3～0.5 mmol/L的巯基氧化型介导剂二酰胺(diamide DM)处理hHSF1; 在体内用浓度为0.1 mmol/L的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂丁硫堇处理HeLa细胞, 都可形成一种致密的、分子内二硫键交联的氧化型hHSF1(ox-hHSF1), 使hHSF1三体形成和活化被阻断. 二酰胺的这种作用呈剂量依赖; 在电泳前加入浓度为0.4～0.5 mmol/L的巯基还原剂二硫苏糖醇(DTT)到DM处理过的标本中再培育, 能迅速和完全逆转这种作用. HSF1单体和三体功能域α-螺旋卷曲结构的计算机模型显示, 在hHSF1单体N端和C端的疏水重复区中, 半胱氨酸C1(第153位氨基酸)与半胱氨酸C4(第373位氨基酸)、C5(第378位氨基酸)非常接近, 在合适的氧化作用下很容易形成二硫键, 使HSF1单体形式较为稳定, 不能形成三体并活化. 结果表明, hHSF1的结构和功能与半胱氨酸上巯基的氧化还原化学性能相关;氧化作用和转录因子分子内巯基二硫键交联形成ox-HSF1单体, 可能是衰老细胞热体克转录反应呈渐减性的原因.