新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂的克隆和表达

• 作者: 张英起 石继宏 赵宁 韩苇 颜真
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新型TNF-α 鸡卵清溶菌酶 T辅助细胞表位序列 免疫抑制剂
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 332-335
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3649字
• 语种: 中文

摘要

目的:用鸡卵清溶菌酶(hen egg-white lysozyme,HEL)T辅助细胞表位序列替换新型rhTNF-α3'末端序列,构建和表达新型rhTNF-α免疫抑制剂.方法:克隆、表达、纯化和鉴定新型rhTNF-α免疫抑制剂.结果:DNA测序表明,重组新型hTNF-αHEL的3'末端序列与设计序列完全相同.将其转移到pBV220表达载体中,重组菌经42℃诱导后做SDS-PAGE分析,结果显示该重组体获得了表达,其表达量为菌体总蛋白量的30%,表达形式为包涵体,对该包涵体进行溶解和复性,再经阴离子交换柱纯化,获得的重组蛋白的纯度可达90%以上.免疫印迹鉴定结果证实,该表达蛋白可与抗TNF-α抗体产生免疫反应.体外杀伤活性检测显示,该蛋白已完全丧失了新型TNF-α的体外杀伤活性.结论:上述实验证实,新型rhTNF-α免疫抑制剂构建成功,该免疫抑制剂既保持了与TNF-α抗体结合的能力又失去了TNF-α的杀伤活性,为其下一步治疗作用的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	颜真	第四军医大学生物技术中心	84	776	12.0	25.0
2	张英起	第四军医大学生物技术中心	124	825	12.0	23.0
3	韩苇	第四军医大学生物技术中心	46	459	9.0	20.0
4	赵宁	第四军医大学生物技术中心	35	228	10.0	13.0
5	石继宏	第四军医大学生物技术中心	2	2	1.0	1.0