应用USE定点诱变技术制备Wilson病突变体

• 作者: 丰岩清 国宁 徐琳 梁秀龄 王莹 陈曦 黄帆
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 肝豆状核变性/遗传学 定点诱变
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 585-588
• 页数: 4页
• 分类号: R742.4
• 字数: 3474字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2003.06.016

摘要

[目的]克隆 Wilson病( WD)基因的全长 cDNA,制备 WD的突变体,为进一步研究突变蛋白的功能奠定基础.[方法]采用 RT-PCR和 TOPO-TA克隆技术,克隆了全长 WD cDNA,并以此为膜板应用 USE定点诱变技术(特异性位点抹除技术)构建了 778位( CGG→ CTG)、 1069位( GTG→ GTC)两个突变体.[结果]成功克隆了 WD cDNA,并经过全长测序没有发现突变的存在.以此为模板制备了 WD基因 8号外显子第 778位密码子由 CGG突变为 CTG、 14号外显子 1069位 GTG→ GTC的突变体,从而构建了含中国人和欧美 WD基因的高频突变点.[结论]USE定点诱变技术是寡核苷酸引物诱变技术的一个重大的改进,该技术采用双位点同时突变的方法,经两次酶切,两次转化,选择效率很高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丰岩清	中山大学附属第一医院神经科	36	116	6.0	8.0
2	国宁	中山大学附属第一医院神经科	42	99	6.0	8.0
3	徐琳	中山大学附属第一医院神经科	17	89	5.0	9.0
4	梁秀龄	中山大学附属第一医院神经科	76	515	11.0	18.0
5	陈曦	中山大学附属第一医院神经科	82	366	11.0	15.0
6	王莹	中山大学附属第一医院神经科	52	319	11.0	15.0
7	黄帆	中山大学附属第一医院神经科	52	228	8.0	11.0