Survivin反义寡核苷酸诱导肝癌细胞凋亡及细胞结构的变化

• 作者: 尹致良 田伏洲 蔡忠红 陈涛
• 来源期刊: 中华普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 细胞死亡 寡核苷酸类,反义
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 676-679
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1007-631X.2003.11.012

摘要

目的采用反义寡核苷酸封闭肝癌细胞中Survivin基因的表达,研究其诱导细胞凋亡过程中对细胞超微结构与细胞骨架的作用及其机理. 方法采用脂质体介导Survivin 反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western-blot及原位杂交方法检测Survivin蛋白及mRNA表达,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,透射电子显微镜观察细胞超微结构变化,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架微丝系统变化,激酶活性检测方法测定细胞内Caspase-3活性变化. 结果脂质体介导Survivin反义寡核苷酸转染肝癌细胞后Survivin蛋白及mRNA表达分别由69.59及75.60降低至10.71及22.90,Caspase-3活性由0.0153升高至0.0992,同时细胞结构呈典型凋亡改变,细胞内微丝形态结构破坏,细胞凋亡比率由0.7%增加至31.4%. 结论脂质体介导转染Survivin反义寡核苷酸可以有效降低细胞内Survivin基因的表达,并激活Caspase-3.活化的Caspase-3可以切割破坏细胞内骨架微丝系统的结构,进而诱导细胞凋亡.