马传染性贫血病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建

• 作者: 仇华吉 杨志彪 涂亚斌 王柳 童光志 谷守林
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马传染性贫血病毒 驴白细胞弱毒疫苗株 感染性分子克隆
• 年，卷（期）: 2003,（12）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 1560-1565
• 页数: 6页
• 分类号: S821
• 字数: 4457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2003.12.023

摘要

采用PCR方法分3段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株(EIAV DLA)的前病毒DNA,这3个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组,PCR产物经克隆后顺次连接,获得1个含有EIAV全基因(8.0kb)的重组质粒,将其命名为p8.0.将此8.0kb EIAV全基因再亚克隆到含有一完整EIAV DLA株长末端重复序列的质粒中,获得一含有EIAV驴白细胞弱毒前病毒全基因的重组质粒,将其命名为p8.2,经核苷酸序列分析,证明p8.2含有EIAV前病毒的全基因.用p8.2转染驴白细胞,将其作为种毒进行传代,于感染该克隆毒的细胞培养上清中检测出了反转录酶活性,说明在驴白细胞中由p8.2衍生出了EIA病毒.驴白细胞经该克隆毒感染后,第4天出现病变,经透射电镜可观察到典型的马传染性贫血病毒粒子,进一步证明p8.2具有感染性,笔者获得了马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆,为进一步在分子水平上阐明我国EIAV疫苗株的减毒机理和免疫保护机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	仇华吉	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	100	1106	19.0	30.0
2	童光志	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	168	2158	24.0	40.0
3	王柳	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	19	305	7.0	17.0
4	涂亚斌	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	6	32	2.0	5.0
5	杨志彪		3	24	2.0	3.0
6	谷守林	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	16	211	8.0	14.0