丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3与乙型肝炎病毒 X蛋白协同反式激活作用的研究

• 作者: 刘妍 张玲霞 成军 杨倩 牟劲松 王建军 王琳 陆荫英
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS3 乙型肝炎病毒 X蛋白 反式激活
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 47-49
• 页数: 3页
• 分类号: R512.63
• 字数: 2800字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2003.01.017

摘要

构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)的重组表达质粒pcDNA3.1(一)-NS3和表达乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白的重组质粒pcDNA3.1(一)-X,分别瞬时转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,用免疫印记(Western blotting)方法鉴定病毒基因的表达.两个表达质粒分别及同时与报告质粒pCAT3-promoter共转染HepG2细胞,检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达水平,酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV40病毒早期启动子功能的影响.结果显示,两个重组表达载体pcDNA3.1(一)-NS3及pcDNA3.1(一)-X在HepG2细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白;单独共转染实验中pcDNA3.1(一)-NS3、pcDNA3.1(一)-X组的CAT的表达分别是对照的3.5倍和4.4倍,两种质粒共同转染时酶的表达是对照的8.5倍;表达质粒对CAT酶表达的激活作用呈剂量依赖性.研究表明,HepG2细胞中表达的HCV NS3蛋白和HBV X蛋白均具有反式激活SV40早期启动子的功能,并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性.本实验有助于解释HCV、HBV感染,尤其是共同感染的致病(癌)机制.