丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活SV40病毒早期启动子的研究

• 作者: 刘妍 张玲霞 成军 李克 牟劲松 王建军 王琳 陆荫英
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 非结构蛋白NS3 真核表达 反式激活 SV40早期启动子
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 44-46
• 页数: 3页
• 分类号: R512.63
• 字数: 2892字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2003.01.016

摘要

聚合酶链反应(PCR)扩增丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(一)中,构建HCVNS3基因真核表达载体pcDNA3.1(一)-NS3;以该质粒转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,免疫印迹方法(Western blotting)检测转染细胞中HCV NS3蛋白的瞬时表达;与报告质粒pCAT3-promoter共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性.结果显示,质粒pcDNA3.1(一)-NS3在HepG2细胞瞬时表达HCV NS3蛋白,共转染实验中pcDNA3.1(一)-NS3组的CAT表达活性是空质粒对照组的4.6倍.表明构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白,并能够反式激活SV40病毒早期启动子.本研究为进一步克隆HCV NS3蛋白反式激活的靶基因,为深入阐明HCV NS3蛋白致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供了理论基础.