丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活SV40病毒早期启动子的研究

• 作者: 刘妍 张玲霞 成军 段惠娟 牟劲松 王建军 王琳 陆荫英
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: C型肝炎样病毒属 病毒非结构蛋白类 多瘤病毒,猕猴
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-83
• 页数: 3页
• 分类号: R373.21
• 字数: 2715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2003.02.001

摘要

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A的反式激活作用. 方法:扩增HCV NS5A基因,构建HCV NS5A基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5A;并转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,免疫印迹方法检测转染细胞中HCV NS5A蛋白的瞬时表达;与报告质粒pCAT3-promoter共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附方法检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性. 结果:质粒pcDNA3.1(-)-NS5A在HepG2细胞瞬时表达HCV NS5A蛋白,共转染实验中pcDNA3.1(-)-NS5A组的CAT表达活性是空质粒对照组的 3.8 倍. 结论:构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白,并能够反式激活SV40病毒早期启动子.本研究为进一步克隆HCV NS5A蛋白反式激活的靶基因,深入阐明HCV NS5A蛋白致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供依据.