人HUT78细胞褪黑素受体的基因与蛋白表达的研究

• 作者: 刘志民 张慧 赵瑛 陈向芳 顾明君
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HUT78细胞 受体,褪黑素mt1 MT2 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 214-216
• 页数: 4页
• 分类号: R363|R585
• 字数: 2536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2003.03.009

摘要

为了检测人HUT78细胞是否存在褪黑素受体(melatonin receptor,MR)及其亚细胞分布特点,采用异硫氢酸胍-苯酚-氯仿一步法抽提总RNA,进一步通过RT-PCR方法检测MR亚型mt1和MT2的mRNA,并将RT-PCR的阳性产物通过自动测序仪测序;同时应用免疫组化染色方法检测mt1和MT2受体亚型蛋白在HUT78细胞内的分布特点.RT-PCR方法则得到了368bp mt1 cDNA片段,无321bp MT2 cDNA片段,同时将mt1阳性条带通过胶回收、测序,结果显示扩增产物与人mt1受体亚型的基因序列相吻合;免疫组化结果显示,人HUT78细胞存在mt1受体蛋白,主要分布于细胞膜和细胞浆,呈棕褐色阳性颗粒,而细胞核上未见阳性颗粒,MT2受体蛋白则未检出.提示褪黑素(melatonin,Mel)对T淋巴细胞具有直接调节作用,为研究生理及病理情况下Mel调节免疫系统的作用机制奠定了基础.