噬菌体随机肽库分析HIV-1 p24抗原表位

• 作者: 孟淑芳 宋爱京 尹红章 李德富 李秀华
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 核心区抗原p24 噬菌体随机肽库 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 67-71
• 页数: 5页
• 分类号: R37
• 字数: 4810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2003.01.026

摘要

目的利用噬菌体随机肽库分析抗HIV-1核心区抗原p24单抗在抗原上的识别位点. 方法用抗HIV-1 p24单抗2C7和3H10作为筛选分子,对噬菌体肽库进行生物淘洗(biopanning),并通过DNA测序、ELISA效价测定等对所获得的噬菌体克隆进行鉴定,最后对合成的7肽位点通过间接ELISA及竞争抑制试验进行血清学分析. 结果序列分析结果表明,单抗2C7和3H10在HIV-1 p24上的抗原识别表位的保守序列分别为DHPXPXX和XXXXKAF.分别合成这2个7肽氨基酸序列P-C1(DHPSPWG)和P-H3(SPWLKAFGGGS),并分析其免疫学结合特性,结果表明与P-H3相比,单抗2C7的抗原识别表位P-C1的固相结合特性较好,固相P-C1检测血样,13份抗HIV阳性样本中,12份为阳性(检出率为92.3%),19份抗HIV阴性样本中,仅1份为假阳性结果(特异性为94.7%).与P-C1相比,单抗3H10的抗原表位P-H3的固相结合能力极差,但液相结合活性较好,血样与P-H3的抑制试验表明,13份抗HIV阳性样本中12份样本对P-H3的抑制率大于60%(12/13),而9份抗HIV阴性样本中仅1份对P-H3的抑制率大于50%. 结论用抗HIV-1 p24单抗筛选噬菌体随机肽库,获得单抗在p24抗原上的识别表位的氨基酸序列,血清学结果表明这2个抗原表位存在于p24自然抗原上,在抗HIV-1的感染检测中具有潜在的应用价值.