大鼠GDNF基因的克隆表达及对PC12工程细胞的影响

• 作者: 丁达夫 张磬 王丽梅 路长林 陈哲宇 陈雪红 魏传垠
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 胶质细胞源性神经营养因子 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 基因表达 PC12 细胞 转染
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 263-268
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4619字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2003.03.008

摘要

克隆与表达大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)并观察其对PC12工程细胞的影响.从新生4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA,通过 RT-PCR方法,扩增出GDNF cDNA.构建表达质粒pET-GDNF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导GDNF表达并在Ni2+-NTA柱上用一步复性法纯化和复性.把PCDNA3.0-GFRα1和pcDNA3.0-RET质粒双转染入PC12细胞,G418筛选稳定克隆,构建PC12工程细胞.用GDNF刺激工程细胞,3天后观察其存活和分化.大鼠GDNF cDNA 的克隆与表达获得成功,纯化和复性的重组GDNF蛋白可显著增强PC12-GFRα1-RET工程细胞的存活和分化.初步明确GDNF诱导PC12工程细胞存活和分化是通过RET-依赖途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雪红	青岛大学医学院病理生理学教研室	42	183	8.0	12.0
2	陈哲宇	第二军医大学神经生物学教研室	38	218	8.0	12.0
3	路长林	第二军医大学神经生物学教研室	98	695	13.0	21.0
4	王丽梅	第二军医大学神经生物学教研室	5	27	3.0	5.0
5	魏传垠	山东淄博卫生学校外科教研室	1	8	1.0	1.0
6	张磬		1	8	1.0	1.0
7	丁达夫		1	8	1.0	1.0