8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞p16基因启动子DNA结合蛋白及其mRNA表达的影响

• 作者: 丁一 吴景兰 宫璀璀 张莹 王一菱 苏安英
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: Eca-109细胞 8-Br-cAMP 槲皮素 DNA结合蛋白 核基质蛋白 p16基因启动子 Southwestern印迹
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 691-693
• 页数: 3页
• 分类号: R329.28
• 字数: 1680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2003.05.013

摘要

目的:应用Southwestern技术研究8-Br-cAMP和槲皮素(quercetin)对Eca-109细胞DNA结合蛋白与p16基因启动子区的结合调控mRNA表达的影响.方法:将贴壁培养的Eca-109细胞随机分成3组,Br组:加8-Br-cAMP至终浓度为2×105 mol/L;Q组:加槲皮素至终浓度为43 μmol/L;C组:不加任何药物,只加入新培养液培养.同时培养48 h,应用质粒提取及限制性酶切回收目的DNA片段,采用生物素随机引物标记探针;应用DNA斑点印迹技术检测探针的灵敏度后以Southwestern印迹技术检测与p16基因启动子区特异性结合的DNA 结合蛋白(DBP);以原位杂交检测p16基因mRNA的表达情况.结果:实验组条带强于对照组,Br组强于Q组;核基质DNA结合蛋白主带位于Mr66 000、58 000和20 000;核外DNA结合蛋白主带位于Mr40 000、28 000和20 000;2者中20 000是共同成分.原位杂交技术显示p16基因mRNA蓝紫色信号颗粒位于胞质,杂交信号以实验组较强.结论:8-Br-cAMP和quercetin尤其是前者作用于人食管癌Eca-109细胞,诱导产生与p16基因启动子结合较强的DBP,启动p16基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁一	郑州大学分子细胞生物学研究中心	66	230	9.0	11.0
2	苏安英	河北工程学院医学部	47	223	8.0	13.0
3	张莹	郑州大学分子细胞生物学研究中心	56	227	8.0	13.0
4	吴景兰	郑州大学分子细胞生物学研究中心	70	427	11.0	18.0
5	宫璀璀	解放军第153医院检验中心	21	54	5.0	6.0
6	王一菱	郑州大学分子细胞生物学研究中心	24	69	5.0	7.0