抑癌基因p15对人胆管癌细胞增殖影响与基因治疗适合靶点选择的相关性

• 作者: 傅赞 德伟 武正炎 王若宁 赵翰林
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 抑制 肿瘤 胆管癌 细胞周期
• 年，卷（期）: 2003,（32）
• 所属期刊栏目: 博士论坛
• 页码范围: 4322-4324
• 页数: 4页
• 分类号: R735.8
• 字数: 3264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2003.32.023

摘要

背景 :对于胆管癌的治疗目前临床缺乏有效的诊治手段,抑癌基因替代疗法正逐步成为一种新型的、重要的抗肿瘤措施. P15作为一种重要的抑癌基因,发现可抑制肝癌细胞生长.但是对于其在胆管癌中的作用的相关研究尚在探索阶段 ,本研究为预防人胆管癌的发生提供一个理论框架. 目的 :通过构建稳定高表达抑癌基因 p15的人胆管癌细胞模型,研究 p15对胆管癌细胞增殖的影响. 设计:完全随机,设立实验对照组,开放性实验研究. 地点和对象 :实验地点在南京医科大学生化与分子生物学研究室 ,研究对象为人胆管癌细胞系. 干预:以稳定高表达 p15的人胆管癌细胞模型为实验组,稳定表达空载体的细胞模型为对照组.将抑癌基因 p15的 cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pcDNA3- neo中的 EcoRⅠ / XbaⅠ位点 ,构建成 p15真核表达质粒 pcDNA3p15;通过脂质体法将 pcDNA3p15质粒转染人胆管癌细胞系 QBC939,经 G- 418筛选 ,获得稳定高表达 p15的人胆管癌细胞模型及相应的表达空载体的细胞模型,并经 Western分子杂交分析证实. 主要观察指标:观察实验组和对照组细胞增殖速率、细胞克隆形成能力、细胞周期、 c- Fos蛋白表达水平的差异 结果:与对照组相比 ,p15高表达的人胆管癌细胞 QBC939的增殖受到明显抑制;克隆形成实验结果表明,高表达 p15人胆管癌细胞所形成的克隆明显少于对照组所形成的克隆 (P< 0.01);流式细胞光度术表明 p15同时阻遏细胞由 G1期向 S期及 G2期向 M期的转换; Western免疫印迹分析结果表明,高表达 p15抑癌基因的细胞癌基因 c- Fos的蛋白水平下降约为对照组的 40%. 结论: p15高表达明显抑制了人胆管癌细胞的生长 ,并且基因 c- myc的蛋白水平表达下降可能是 p15抑制细胞增殖的分子机理之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武正炎	南京医科大学第一附属医院普外科	138	1021	15.0	24.0
2	赵翰林	南京医科大学第一附属医院普外科	70	336	10.0	13.0
3	傅赞	南京医科大学第一附属医院普外科	42	172	7.0	10.0
4	德伟	南京医科大学生化与分子生物学系	89	434	10.0	16.0
5	王若宁	南京医科大学生化与分子生物学系	14	38	4.0	5.0