重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体基因的克隆及工程菌的构建与鉴定

• 作者: 傅一工 刘建宁 刘蓓钫 张巍 张菁 朱镇华 杨庆 王石泉 陈于红
• 来源期刊: 南京大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 组织型人纤溶酶原激活剂变体基因 工程菌 质粒稳定性 表达稳定性
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 蛋白质多肽药物制造与临床前研究专栏
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 2553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0469-5097.2004.01.001

摘要

利用RT-PCR技术,从人脐带静脉上皮细胞中克隆人组织型纤溶酶原激活剂基因,将其接入TA克隆载体PCR 2.1中,经DNA序列测定后,以该重组质粒DNA为模板,用PCR方法获得了人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)基因,将其转入pET29a,构建了重组表达质粒pET29a/K2tPA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,构成工程菌.经IPTG诱导表达,在40kDa处有一明显表达条带,表达量为约占菌体总蛋白的20%.该菌种在贮存与复苏及传代过程中具有良好的质粒稳定性和表达稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈于红	南京大学分子医学研究所	12	76	4.0	8.0
2	张菁	南京大学分子医学研究所	23	143	8.0	11.0
3	刘建宁	南京大学分子医学研究所	31	169	7.0	12.0
4	张巍	南京大学分子医学研究所	51	428	12.0	19.0
5	朱镇华	南京大学分子医学研究所	10	50	5.0	6.0
6	刘蓓钫	南京大学分子医学研究所	5	25	3.0	5.0
7	王石泉	南京大学分子医学研究所	11	134	5.0	11.0
8	傅一工	南京大学分子医学研究所	2	5	1.0	2.0
9	杨庆	南京大学分子医学研究所	2	9	2.0	2.0