hsp90α基因在染色质模板上的热诱导转录

• 作者: 代辉 吴宁华 张业 李兆勇 杨珺 沈珝琲
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 全细胞抽提物 体外转录 RT-PCR 染色质组装
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 533-536
• 页数: 4页
• 分类号: Q-3
• 语种: 中文

摘要

目的在体外将带有hsp90α基因启动子的报告基因质粒pBLCAT3α1组装为染色质模板,用于研究hsp90α基因的热诱导转录.方法采用竞争性RT-PCR定量检测基因启动子活性的方法,研究染色质模板的体外组装,并比较染色质模板与裸露DNA模板上基因的转录活性.结果优化了热休克处理的HeLa全细胞抽提物在基因转录活性研究中的实验条件:用体外重组表达的染色质组装相关因子与核心组蛋白在体外与hsp90α基因启动子质粒组装成染色质;证明染色质模板的hsp90α基因体外转录水平低于裸露DNA模板,而其热诱导效率显著高于对照组.结论在体外组装的染色质模板具有阻遏hsp90α基因转录的活性,但明显提高了该基因的热诱导表达效率.