实验大鼠泰泽菌检测方法的比较研究

• 作者: 王春玲 贺争鸣 邢瑞昌 邢进 高正琴
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 芽孢杆菌,梭状 聚合酶链反应 荧光抗体技术,间接
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 142-146
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.1
• 字数: 4400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2004.03.003

摘要

目的比较实验大鼠泰泽菌检测方法─nested-PCR、IFA、免疫抑制诱发试验-触片染色镜检和组织病理学诊断.方法根据泰泽菌16S rDNA合成引物,对16个菌株作nested-PCR扩增并进行特异性、敏感性试验、验证.将此PCR应用于20只免疫抑制Wistar大鼠和5只非免疫抑制SD大鼠泰泽菌检测,并作IFA、常规细菌学检测和组织病理学诊断.结果 nested-PCR中仅有泰泽菌出现196 bp特异性扩增条带;而15株非泰泽菌均未出现此扩增条带.该PCR能检出10 pg泰泽菌DNA.将此PCR应用于大鼠泰泽菌检测,结果未检出阳性样品.nested-PCR与常规细菌学检测、组织病理学诊断结果相一致.采用IFA方法,以购得的大鼠泰泽菌抗原片对上述25份大鼠血清进行检测,结果有6份血清产生非特异性反应.结论采用IFA对动物群进行筛查出现阳性结果,须采用免疫抑制诱发试验、PCR和组织病理学诊断技术组合进一步验证.本研究建立的nested-PCR方法,特异、敏感、快速,结合组织病理学诊断技术对实验动物泰泽菌感染可做出精确诊断.