泰泽菌PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 姚智慧 王春玲 罗建辉 董关木 贺争鸣 邢瑞昌
• 来源期刊: 中国实验动物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 泰泽菌 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 224-227
• 页数: 4页
• 分类号: Q93-332
• 字数: 2784字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2001.04.009

摘要

目的建立和应用泰泽菌巢式PCR检测方法.方法参照日本学者Goto 检测泰泽菌16S rDNA序列设计的两对引物, 对PCR的检测条件进行了改进和优化.结果巢式PCR反应的外引物能引导扩增出一条625!bp的DNA片段,内引物则能引导扩增出一条196!bp的 DNA片段.此625!bp和196!bpDNA片段的大小均与 Goto 报道的结果完全一致.试验证明196!bp的阳性带为泰泽菌16S rDNA特异性保守片段.通过将泰泽菌阳性肝组织标本经系列稀释的试验表明,该PCR方法的检测灵敏度为2个菌.另外,将阳性对照标本扩增的625!bp DNA片段作核酸序列测定,发现其碱基序列与 Goto 报道的泰泽菌MSK株及RJ株16S rDNA 序列均有99%同源性.结论根据上述结果,我们应用本方法对普通级小鼠、大鼠、金黄色地鼠肝组织标本各5份、普通级豚鼠肝组织标本10份、沙鼠肝组织标本10份、MHV3感染的小鼠肝组织1份进行了初步检测,结果未发现带菌动物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺争鸣		122	809	15.0	21.0
2	邢瑞昌		56	497	13.0	19.0
3	董关木		87	672	14.0	22.0
4	姚智慧		23	139	6.0	11.0
5	罗建辉		6	12	2.0	3.0
6	王春玲		13	24	3.0	4.0