两种巨噬细胞系中PKC亚型表达的差别与其抗瘤活性的比较:依赖一氧化氮的杀瘤机制

• 作者: 刘辉 吴孟超 孙为民 徐仁宝 曹惠芳 王红阳
• 来源期刊: 中德临床肿瘤学杂志(英文版)
• 关键词: 脂多糖 蛋白激酶C 巨噬细胞 一氧化氮 细胞毒活性
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 页码范围: 101-105
• 页数: 5页
• 语种: 英文

摘要

目的探讨LPS诱导的巨噬细胞杀瘤效应以及与PKC相关的分子机制.方法两种巨噬细胞系P388D1和RAW264.7用LPS刺激、或先用PMA长期处理下调PKC表达、或用L-NAME阻断iNOS后再以LPS刺激,检测其杀伤肿瘤细胞系P815(MTT法)及分泌IL-1,TNF-α(ELISA法)和NO(Griess试剂)的作用;并用Western blot法检测PMA长期作用后两株细胞系中PKC亚型的表达.结果LPS刺激的RAW264.7细胞有杀伤靶细胞的功能,而P388D1几乎没有杀伤作用.PMA预处理(1μg/mL,24h)后可明显抑制LPS诱导的杀瘤作用.因上述结果提示PKC在巨噬细胞杀瘤活性中可能的重要作用,比较了PMA处理后两株细胞PKC亚型的表达:Western blot结果显示,在所检测的PKCα,β1,β2,δ及ε5种亚型中,在P388D1细胞均有表达,而在RAW264.7细胞仅有PKCα,PKCβ1,PKCδ表达;1μg/mL PMA作用24h后明显下调了RAW264.7细胞PKCα,PKCβ1和PKCδ的表达,在P388D1则有PKCα、PKCδ和PKCε下调,而PKCβ1和PKCβ2不被下调.结合LPS诱导的与PKC活化有关的IL-1、TNF-α及NO的产生,发现在P388D1细胞几乎不产生NO,而在RAW264.7细胞,NO合成酶抑制剂L-NAME不仅能阻断LPS诱导的NO的产生,而且明显抑制LPS诱导的杀瘤活性.结论 LPS诱导的巨噬细胞杀瘤作用主要是NO的杀伤作用来完成而非巨噬细胞直接与瘤细胞作用所致;而该作用与PKCβ活性密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴孟超	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	35	352	9.0	18.0
2	刘辉	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	4	5	2.0	2.0
3	王红阳	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	3	49	2.0	3.0
4	曹惠芳	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	1	1	1.0	1.0
5	孙为民	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	1	1	1.0	1.0
6	徐仁宝	上海第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究所	2	4	1.0	2.0