G-CSF受体胞内区结合蛋白COXⅡ的分子克隆及相互作用验证

• 作者: 从玉文 冯彦斌 刘晓辉 善亚君 苑晓玲 赵振虎
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: G-CSF受体胞内区 酵母双杂交系统 哺乳动物细胞双杂交系统 COXⅡ
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 15-21
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 3839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2004.01.004

摘要

为寻找与G-CSF受体胞内区相互作用的蛋白,探讨其可能的信号传导机制,应用酵母双杂交技术从小鼠胎肝文库中筛选到与G-CSF受体胞内区相互作用的蛋白-细胞色素C氧化酶Ⅱ亚基(COXⅡ);采用PCR技术从小鼠肌肉cDNA中克隆到全长COX Ⅱ,并应用哺乳动物细胞双杂交实验验证了COXⅡ与G-CSF受体胞内区相互作用;构建了一系列G-CSF受体胞内区短截体,应用细胞双杂交技术确定COXⅡ主要结合于G-CSF受体的Box3区;随后构建了COXⅡ-GFP融合表达载体,观察到COXⅡ在COS7细胞中为全细胞分布.这些结果为揭示COXⅡ的新功能及发现G-CSFR新的信号传递通路提供了线索.