大鼠海马脑片缺血-再灌注模型中一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

• 作者: 刘晓春 孙宁 孟宪芳 张静 施静
• 来源期刊: 中国脑血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 海马 一氧化氮 一氧化氮合酶 缺血-再灌注损伤
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 457-460
• 页数: 4页
• 分类号: R74
• 字数: 3552字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5921.2004.10.009

摘要

目的建立器官型海马脑片缺血-再灌注模型,以阐明一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血-再灌注中的作用.方法以12只出生7～8 d的Sprague-Dawley乳鼠制备海马脑片,根据培养时间随机分为4组,每组2个微孔膜,每个Millcell-CM微孔膜放置6张脑片,在培养液和气体界面上培养脑片,4组中每组36张脑片.培养14 d后,缺氧、缺糖30 min,再灌注12、24和36 h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹技术,分别检测脑片组织中一氧化氮、NOS的mRNA和蛋白质水平的变化;用改良镉还原法检测培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量;生化法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平.结果缺血-再灌注模型的脑片组织,诱导性的一氧化氮合酶(iNOS)和神经源性的一氧化氮合酶(nNOS)在mRNA和蛋白质水平均表达上调,培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量明显高于对照组,差异有显著意义(P＜0.05).同时,培养液中LDH的水平随再灌注时间的延长而升高.结论一氧化氮及NOS在脑缺血-再灌注损伤中起着重要作用.