A型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆及高效表达

• 作者: 吴东林 姜永强 康琳 王利春 王景林
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: A型产气荚膜梭菌 α毒素 基因表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-30
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.01.009

摘要

目的:实现产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens alpha toxin,CPa)基因的克隆与表达.方法:用PCR技术从A型产气荚膜梭菌中扩增出CPa基因,克隆到原核表达载体pQE30中,构建了重组质粒pQE30-CPa,转化E.coli M15获得了CPa的高效表达.结果:序列测定和双酶切表明,CPa基因正确插入载体.序列分析发现CPa基因与GenBank中的4种CPa基因相似率为76.7%～99.9%.工程菌裂解液经SDS-PAGE分析显示在相对分子质量43?000处有一条表达很强的蛋白区带,与CPa相对分子质量相符,约占菌体总蛋白的62.88%,主要以包涵体形式存在.免疫印迹结果表明, 表达的重组CPa蛋白同抗CPa血清有特异性结合.结论:为进一步研究CPa重组疫苗和制备CPa的特异性抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜永强	军事医学科学院微生物流行病研究所	44	201	7.0	11.0
2	吴东林	解放军军需大学军事兽医研究所	10	79	4.0	8.0
3	王景林	军事医学科学院微生物流行病研究所	44	147	6.0	9.0
4	康琳	军事医学科学院微生物流行病研究所	21	51	4.0	5.0
5	王利春	内蒙古大学生物工程中心	6	17	3.0	4.0