抗H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 曹振 王传彬 王宏伟 田克恭 秦亚曼 苏敬良 陈西钊
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 禽流感病毒 抗体,单克隆 血凝及抑制试验
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 专论(一)
• 页码范围: 197-199
• 页数: 3页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2004.04.002

摘要

目的建立稳定分泌抗H5N1亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞系,为进一步研究禽流感诊断技术奠定基础.方法以纯化的H5亚型禽流感病毒按常规方法免疫BALB/c小鼠,最后一次免疫后第3天取其脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用选择性培养、有限稀释法克隆和血凝抑制试验进行筛选,对获得阳性克隆株用ELISA方法进行亚型鉴定,并用37株H5、H7、H9亚型AIV测定其特异性、覆盖性.结果最后获得了3株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,命名为1E5、4A4、4B1,经长期体外培养和冻存后复苏能稳定地分泌抗体.经鉴定,其亚型均为IgG1、kappa链.腹水HI效价1:210～1:216,细胞培养上清HI效价1:26～1:28.3株杂交瘤所分泌的单克隆抗体均能与本中心保存的全部20株H5亚型禽流感病毒分离株发生反应,而与15株H9亚型禽流感病毒分离株、2株H7亚型禽流感病毒分离株以及H1-H4、H6-H15亚型禽流感病毒标准毒株均不反应,与鸡新城疫病毒、鹅新城疫病毒、鹅腺病毒和鸡产蛋下降综合征病毒等均无交叉反应.结论所获3株单克隆抗体可用于禽流感病毒特异性诊断试剂的研制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈西钊		22	220	8.0	14.0
2	田克恭		43	453	11.0	19.0
3	苏敬良		92	1180	19.0	30.0
4	王传彬		18	271	8.0	16.0
5	王宏伟		13	131	7.0	11.0
6	曹振		7	92	5.0	7.0
7	秦亚曼		2	14	1.0	2.0