双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌

• 作者: 刘小立 吴平芳 庄志雄 扈庆华 李庆阁 王冰 石晓路 贺连华 郑薇薇
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌 副溶血弧菌 改良分子信标 双重实时PCR 同步检测
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 1004-1007
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.12.024

摘要

目的建立改良分子信标-双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法,应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验. 方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,分别设计引物和改良分子信标探针,以10种细菌作对照,建立双重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测. 结果改良分子信标-双重实时PCR反应体系DNA灵敏度为102.4～166.6fg/μl,菌液灵敏度为32～64CFU/ml或3～6CFU/PCR反应体系,无交叉反应.此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰.对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测,9份副溶血弧菌实时PCR阳性,其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性,其余样品都为阴性.从样品处理到检测结果仅需1天时间. 结论改良分子信标-双重实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庄志雄		147	734	14.0	20.0
2	王冰		36	359	11.0	17.0
3	石晓路		61	452	12.0	18.0
4	郑薇薇	厦门大学生命科学学院	8	88	3.0	8.0
5	刘小立		23	326	11.0	17.0
6	李庆阁	厦门大学生命科学学院	40	365	10.0	18.0
7	扈庆华		62	498	12.0	19.0
8	贺连华		22	243	10.0	15.0
9	吴平芳		19	185	8.0	13.0