人胚脑神经干细胞的分离培养、克隆和分化

• 作者: 徐慧君 田美玲 秦建兵 谭雪锋 金国华
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经干细胞 培养 克隆 分化 人胚
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 262-266
• 页数: 5页
• 分类号: R33
• 字数: 4341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7547.2004.03.009

摘要

探讨从人胚脑分离培养的神经干细胞在增殖和分化方面的生物学特点.用无血清培养技术从4月龄人胎中脑组织中分离培养出神经干细胞.用有限稀释法获得单细胞克隆球.消化后用含BrdU的培养液培养,待形成神经干细胞球后,进行BrdU和nestin免疫荧光检测.取第4代神经干细胞球用含10%FBS的培养液诱导分化,3周后分别进行神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞特异性标记物MAP-2(FAP和CNP免疫荧光检测.结果显示,单细胞悬液培养2周后可形成神经干细胞球;神经球Br-dU和nestii免疫荧光检测均呈阳性;神经干细胞分化后呈MAP-2、GFAP和CNP阳性的三种类型细胞,但分化的神经元数量较少、胞体较小、突起较少.提示从人胚中脑组织中分离得到的神经下细胞具有增殖和自我更新能力,并具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的多分化潜能;与啮齿类动物相比,人神经于细胞增殖速度较慢,分化的神经元较少且稍欠成熟.