2种PCR方法扩增盐藻肌动蛋白基因3'旁侧序列比较

• 作者: 姜国忠 范天黎 薛乐勋 谢华 郭玉忠
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 反向PCB 连接介导法PCR 盐藻 肌动蛋白 旁侧序列cDNA 简并引物
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 41-44
• 页数: 4页
• 分类号: Q754
• 字数: 2521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2004.01.013

摘要

目的:比较扩增盐藻肌动蛋白基因3'旁侧序列的2种PCR方法.方法:用pvuⅡ、EcoRV和Stu I 3种限制性内切酶消化盐藻基因组DNA后,供2种PCR用,一种是连接介导法PCR(LMPCR),与用人工合成的适配子相连并用适配子引物和盐藻肌动蛋白基因特异引物扩增未知序列;另一种是反向PCR(IPCR),酶切后的DNA自身环化做模板,用2对基因特异引物反向扩增.结果:2轮PCR后,LMPCR中得到大量的非特异扩增产物,测序结果发现许多产物是由适配子引物AP2单独扩增引起.而反向PCR在得到pvuⅡ和Stu I消化的自连文库中扩增得到2.5kb特异产物,经测序发现,片段两侧为基因特异引物,部分序列与已知序列相一致.Southern也进一步证实了IPCR扩增片段来源于盐藻基因组DNA.结论:IPCR技术在克隆基因旁侧序列时优于LMPCR方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛乐勋	郑州大学细胞生物学研究室	140	1187	18.0	26.0
2	谢华	郑州大学细胞生物学研究室	31	251	10.0	14.0
3	姜国忠	郑州大学细胞生物学研究室	35	208	8.0	13.0
4	郭玉忠	郑州大学细胞生物学研究室	42	156	8.0	10.0
5	范天黎	郑州大学细胞生物学研究室	36	117	6.0	10.0