聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用

• 作者: 丁选胜 于涛 叶波平 吴梧桐 奚涛 王颖 边杉
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚丙烯酰胺凝胶电泳 DNA银染 半定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 178-182
• 页数: 5页
• 分类号: Q503
• 字数: 4475字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2004.02.019

摘要

目的:探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用.方法:提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA,逆转录得到cDNA第一链,以此为模板进行PCR扩增,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系.结果:PCR扩增反应在第20～25个循环,起始模板量为0.8～2.4μg时,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系.结论:通过控制起始模板量,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DM银染技术,可以通过比较PCR扩增产物量的变化以分析目的基因表达水平的差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王颖	中国药科大学生命科学与技术学院	41	506	12.0	22.0
2	奚涛	中国药科大学生命科学与技术学院	138	927	15.0	25.0
3	吴梧桐	中国药科大学生命科学与技术学院	256	2771	24.0	37.0
4	丁选胜	中国药科大学生命科学与技术学院	107	752	15.0	22.0
5	叶波平	中国药科大学生命科学与技术学院	105	1007	17.0	27.0
6	边杉	中国药科大学生命科学与技术学院	7	160	5.0	7.0
7	于涛	中国药科大学生命科学与技术学院	12	45	3.0	6.0