体外定向诱导E14小鼠胚胎干细胞为肝细胞

• 作者: 包蓉 吴燕峰 孟瑛 郭中敏 闵军 黄绍良
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎 干细胞 肝细胞 分化
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 肝干细胞
• 页码范围: 714-717
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1007-3418.2004.12.004

摘要

目的探索体外定向诱导胚胎干细胞分化为肝细胞.方法常规方法培养E14小鼠胚胎干细胞(ESC)后,进行悬滴一悬浮培养,形成胚胎体,再进行分阶段定向诱导,在培养第9～12天、第12～18天以及第15～18天分别加入酸性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子和制瘤素M.利用倒置相差显微镜观察细胞形态变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析特异性基因mRNA的表达,并用吲哚氰绿(ICG)摄取和过碘酸雪夫反应(PAS)分析细胞的分化及功能.结果在诱导培养的第13天,细胞出现肝细胞样改变.RT-PCR分析可见,在诱导的第6天和第12天分别可以检测到内胚层或卵黄囊分化标志基因--甲状腺素运载蛋白和α1抗胰蛋白酶的mRNA表达,第6天出现未成熟肝细胞标志基因--甲胎蛋白mRNA表达,第9天、第15天和第18天分别开始出现成熟肝细胞的特异性标志基因--白蛋白、葡萄糖6磷酸酶、酪氨酸氨基转移酶mRNA表达.同时,ESC源性肝细胞表现为ICG摄取和PAS反应阳性,经过诱导,ICG阳性细胞数约占 85.1%.结论 ESC源性肝细胞具备肝细胞特性,ESC有可能成为肝细胞治疗的替代供体细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵军	广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心	5	20	3.0	4.0
2	黄绍良	广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心	3	21	2.0	3.0
3	吴燕峰	广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心	4	27	3.0	4.0
4	孟瑛	广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心	1	11	1.0	1.0
5	郭中敏		1	11	1.0	1.0
6	包蓉	广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心	1	11	1.0	1.0