应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒ORF2蛋白建立一种ELISA诊断方法

• 作者: 何启盖 刘正飞 曹胜波 琚春梅 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪2型圆环病毒 ORF2 克隆 表达 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 689-693
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.2|Q786
• 字数: 4510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2004.06.019

摘要

根据GenBank中猪2型圆环病毒(PCV2)序列(AY035820),设计1对引物,并以包含PCV2全基因组的重组质粒pT-PCV为模板,扩增出含ORF2全基因的片段(709 bp),回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,获得重组质粒pTORF2,并对其进行序列测定.重组质粒经Bal Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切,回收ORF2基因,将其插入pGEX-KG的Sma Ⅰ和Sal Ⅰ位点间,构建原核表达质粒pGEXORF2,阳性重组质粒转化E.coli BL21(DE3),进行原核表达.用此表达产物包被酶标板,建立ELISA诊断方法,并对临床676份送检血清进行了检测,结果表明其总阳性率为62.7%(424/676),仔猪阳性率为38.9%(74/190),肥猪阳性率为63.2%(84/133),母猪阳性率为74.6%(249/334),公猪阳性率为89.5%(17/19).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学动物医学院动物病毒室	331	4866	36.0	53.0
2	何启盖	华中农业大学动物医学院动物病毒室	170	2510	25.0	42.0
3	曹胜波	华中农业大学动物医学院动物病毒室	36	641	13.0	25.0
4	刘正飞	华中农业大学动物医学院动物病毒室	40	892	15.0	29.0
5	琚春梅	华中农业大学动物医学院动物病毒室	12	252	9.0	12.0