成年小鼠心肌细胞分离技术

• 作者: 余志斌 张然 王云英
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 心肌细胞 分离
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 656-660
• 页数: 5页
• 分类号: Q463
• 字数: 3857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0371-0874.2004.05.017

摘要

为进行成年小鼠心肌细胞培养与收缩功能研究,首先必须获得高产量与高质量的心肌细胞.本实验采用Langendorff装置行恒流灌流心脏,同时监测灌流压力的变化.根据小鼠鼠龄微调灌流流速,使初始灌流压力保持在40 mmHg.用0.05%单一粗制胶原酶在37℃条件下消化心脏,当灌流压力下降至28 mmHg时,即刻终止消化.轻轻吹散心肌细胞后,用含1%牛血清白蛋白的Joklik's MEM培养液保存,逐步法恢复细胞外钙离子浓度.获得的心肌细胞存活率大于70%,复钙后耐钙心肌细胞静置4 h,心肌细胞存活率仍能保持在(40～50)%.其中,90％以上存活的长杆状心肌细胞无明显搏动,细胞膜表面光滑,横纹清晰,两端边缘锐利,折光性较强,复钙后保存4 h或5.0 Hz刺激5 min后,仍能保持正常形态.在1.0 Hz刺激条件下,心肌细胞缩短幅度为(9.72±0.43)%;2.0 Hz刺激下为(11.28±0.43)%;在5.0 Hz刺激下,达到(11.40±0.45)%.这些结果表明,采用本方法可获得高产量与高质量的成年小鼠心肌细胞,且易于操作,重复性较好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余志斌	第四军医大学航空航天生理学教研室	74	384	10.0	17.0
2	王云英	第四军医大学航空航天生理学教研室	21	93	6.0	9.0
3	张然	第四军医大学航空航天生理学教研室	5	63	3.0	5.0