重组人类神经元14-3-3zeta信号蛋白的纯化及抗体制备

• 作者: 李锋 沈继龙 胡敏
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 神经原/免疫学 抗体,单克隆/分离和提纯
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 186-189
• 页数: 4页
• 分类号: R322.8|R392.11
• 字数: 3177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2004.03.006

摘要

目的制备抗人脑14-3-3 zeta蛋白(31 ku)的多克隆抗体与单克隆抗体,为神经系统退行性疾病的诊断提供标志物.方法用纯化的rh14-3-3zeta蛋白免疫家兔,制备抗14-3-3多克隆抗血清;电洗脱、透析纯化rh 14-3-3/β-半乳糖苷酶融合蛋白,免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗rh 14-3-3 zeta单克隆抗体;测定所得抗体效价及其特异性反应.结果得到大量纯化的表达产物;制备的多克隆抗血清双扩效价达1:8～1:64;获得 1株能稳定分泌抗rh 14-3-3 zeta单抗的杂交瘤细胞株,其亚型为IgG1型,该株单抗可与重组14-3-3蛋白发生特异性反应.结论获得了敏感、特异的抗rh 14-3-3 zeta多克隆抗血清及稳定分泌抗rh 14-3-3 zeta单抗的杂交瘤细胞株,为神经系统退行性疾病提供诊断标记.