16SrRNA基因PCR加基因芯片杂交快速诊断新生儿败血症

• 作者: 吴亦栋 尚世强 童美琴 赵正言
• 来源期刊: 中华儿科杂志
• 关键词: 婴儿,新生 败血病 RNA核糖核体,16s 聚合酶链反应 寡核苷酸序列分析
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 感染性休克
• 页码范围: 663-667
• 页数: 6页
• 字数: 3757字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0578-1310.2004.09.006

摘要

目的探讨新生儿败血症的快速诊断方法.方法 (1)以16SrRNA基因为靶序列,设计引物及寡核苷酸探针;将探针固定在特制的玻片上制作成基因芯片;(2)对临床疑为细菌感染的285例新生儿抽取静脉血分别做血培养和细菌16SrRNA基因检测:于血标本及脑脊液中抽提DNA后采用聚合酶链反应(PCR)扩增,将扩增产物加样在基因芯片上杂交后进行激光扫描及读片.结果 (1) PCR检测阳性率 5.96%(17/285)明显高于血培养的2.81%(8/285),差异有显著意义(P<0.01).若以确诊败血症作为对照,PCR 的诊断敏感性为100%,特异性为96.75%,正确诊断指数为0.968.(2) 对17份PCR阳性标本进一步做基因芯片杂交,结果通用探针均阳性, 其中G+探针阳性12份、G-探针阳性5 份;8份PCR和血培养均阳性的标本,基因芯片杂交探针阳性菌株与血培养细菌阳性结果完全一致.结论基因芯片杂交技术检测临床标本中16SrRNA基因能快速诊断新生儿败血症,除较血培养等方法有更好的敏感性和特异性外,还能快速明确系何种病原菌感染,因此有较大的推广及应用价值.