反义寡核苷酸抑制TGFβ1诱导人肾小管上皮细胞表达CTGF

• 作者: 卓文磊 张璟
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 脂质体 结缔组织生长因子 反义寡核苷酸
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 732-734
• 页数: 3页
• 分类号: R692.6
• 字数: 3629字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2004.05.047

摘要

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,AS)转染人肾小管上皮细胞(human renal tubular epithelial cells,HKC)后对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导CTGF表达的抑制作用.方法采用脂质体转染试剂DOTAP,包裹针对CTGF的反义寡核苷酸转染HKC.用MTT比色法检测DOTAP对细胞增殖的影响,用荧光显微镜和荧光分光光度计检测5′异硫氰酸荧光素(5′FITC)标记的AS在细胞内的分布,用RT-PCR和免疫组化分别检测TGFβ1和AS对CTGFmRNA和蛋白表达的影响.结果MTT比色:不同浓度(0、3.3、6.7、10μl/ml)的DOTAP对细胞增殖的影响无明显差异(P＞0.05).荧光检测:DOTAP能高效地介导AS转染入HKC.RT-PCR和免疫组化:浓度为40μg/ml的TGFβ1能诱导HKC表达CTGFmRNA和蛋白,同时加入DOTAP-AS复合物后(DOTAP浓度为6.7μl/ml,AS浓度为1μg/ml),CTGFmRNA和蛋白的表达明显下降(P＜0.01).结论DOTAP能高效低毒地把CTGF反义寡核苷酸转染入HKC,进而能有效地封闭TGFβ1所诱导的CTGF表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张璟	第三军医大学新桥医院肾内科	28	139	7.0	10.0
2	卓文磊	第三军医大学新桥医院肾内科	37	181	8.0	11.0