人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及免疫学特性分析

• 作者: 卫玲 孙宏彬 季育华 王升年 赵缜
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 pp65 表达纯化 蛋白质印迹法 ELISA
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 479-481,484
• 页数: 4页
• 分类号: R446.6
• 字数: 2401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2004.06.006

摘要

目的:应用生物工程方法研制人巨细胞病毒包膜蛋白pp65,并行相应抗体制备的探讨性研究.方法:利用DNA重组技术,以HCMV AD169病毒株基因组为模板,通过PCR克隆HCMV pp65基因.以pET32a(+)为表达载体,构建重组质粒,并在E.Coli (DE3-plys)中诱导表达.然后经柱层析获得纯化蛋白,由蛋白质印迹法验证蛋白的特异性.最后,免疫小鼠获取抗血清,检测抗体产生的效价.结果:重组质粒经测序与Genebank序列一致,转染的细菌能高效表达目的蛋白,纯化后的蛋白能与已知单克隆抗体结合,免疫后的小鼠抗血清能同时识别重组蛋白和病毒抗原.结论:重组表达的HCMV pp65全蛋白经纯化获得较高纯度,且保留良好的免疫原特性.为HCMV感染诊断用单克隆抗体的研制奠定了基础,并为HCMV感染的免疫诊断和治疗提供了新的研究方向.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	季育华	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	32	220	10.0	13.0
2	赵缜	上海市闵行区中心医院检验科	17	95	6.0	8.0
3	孙宏彬	上海第二医科大学附属瑞金医院检验科	2	3	1.0	1.0
4	卫玲		1	2	1.0	1.0
5	王升年		1	2	1.0	1.0