人巨细胞病毒截短被膜磷蛋白pp65的原核表达及抗原性分析

• 作者: 于锡巧 孟红 宋楠楠 岳盈盈 李志会 李鹏 纪璇
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 pp65蛋白 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2012,（43）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-22
• 页数: 3页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2713字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用大肠杆菌表达系统表达截短人巨细胞病毒(HCMV) pp65蛋白,并对其抗原性进行初步鉴定.方法 采用PCR扩增HCMV pp65基因961～1 686 bp(321aa-562aa)片段,并将其插入表达载体pET30a(+),转化BL21(DE3)菌株,十二烷基硫酸钠—聚丙稀酰胺凝胶(SDS-PAGE)分析蛋白表达,常规镍柱法纯化目的蛋白,以ELISA法初步检测其抗原性.结果 获得相对分子质量约为30 kD的融合蛋白,pp65抗原和全病毒抗原的P/N值分别为2.737、2.535.结论 本研究成功表达截短HCMV pp65抗原,并证实其蛋白抗原性优于全病毒抗原;此为HCMV检测试剂盒的研制和疫苗的研究提供了依据.