鹅副粘病毒NP基因的原核表达及表达产物抗原性检测

• 作者: 何海娟 李曦 杨志 杨玉菊 王君伟
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鹅副粘病毒 NP基因 克隆 原核表达 抗原性检测
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2005.12.001

摘要

根据GenBank中发表的GPMV SF02株的NP基因的核苷酸序列设计合成一对引物,通过RT-PCR扩增JS/1/97/Go株的NP基因,将其克隆入pMD18-T载体,序列测定和分析表明:所扩增的NP基因的核苷酸长为1 470 bp,共编码490个氨基酸.再将NP基因定向亚克隆至原核表达载体pGEX-6P的多克隆位点,经酶切鉴定后将含有NP基因的阳性亚克隆重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用诱导剂IPTG分别以不同的浓度进行诱导,并在不同的诱导时间进行采样,样品经处理后通过SDS-PAGE、Western blot和Dot-ELISA进行分析.结果显示:以终浓度为1 mmol/L IPTG进行诱导4 h表达可达到高峰,表达的融合蛋白大小约为80kD,并具有良好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王君伟	东北农业大学动物医学院	214	1491	20.0	26.0
2	李曦	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	29	175	7.0	12.0
3	何海娟	东北农业大学动物医学院	5	17	2.0	4.0
4	杨志	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	6	16	2.0	4.0
5	杨玉菊	哈尔滨学院生化学院	7	3	1.0	1.0